蛋白表达检测研究

Western blot

  WB实验主要包括三部分：分离（Separation），转印（膜）（Transfer），检测（Detect）

一、分离（Separation）

    样本：混合蛋白（来源：①细胞培养上清；②细胞（胞浆蛋白、胞膜蛋白、胞核蛋白）；③组织匀浆）

    分离方法：变性电泳 （SDS-PAGE凝胶电泳，最常用）；非变性电泳（等电聚焦电泳等）                                 

    电泳前准备

• 样本预处理：蛋白提取液和SDS上样缓冲液 95-100℃变性  

       为了能使抗体接触到抗原表位，必须将蛋白的三维结构打开，因此需要将蛋白变性。

       带有强负电荷的SDS与带有弱电荷的蛋白质结合，大量的SDS可掩盖蛋白质本身的电荷量，使得电泳与蛋      白质自身电荷量无关，只和蛋白质分子大小有关。

• 配置适合浓度的凝胶                                                                

    电泳产品

       手灌胶：手灌胶产品套餐A，手灌胶产品套餐B，单独产品

       预制胶：Bis-Tris预制胶，Tris-甘氨酸预制胶，Tris-乙酸预制胶，Tricine预制胶

       蛋白marker：预染（宽范围marker）、高分子量蛋白marker 、低分子量蛋白marker 、蛋白免疫印迹、荧光、非预染宽范围蛋白marker 、高/低分子量非预染蛋白marker 、等电聚焦 (IEF) 和特殊蛋白marker

二、转印（膜）（Transfer）

       转印（膜）过程是电泳后的蛋白质从凝胶转移至膜（PVDF或NC膜）上的过程。                      

       转印（膜）方法：

         湿式电印迹转膜；

         半干式电印迹转膜；

         干式电印迹转膜

    转印产品：

    仪器：

    湿式： Mini Gel Tank（#B1000），XCell II Blot Module（ #EI9051 ）

    半干式：  Power Blotter XL Welcome Pack（# PB0113 ）； Power Blotter Welcome Pack （ #PB0112 ）  

    干式：iBlot™ 2 Gel Transfer Device（# IB21001 ）； iBlot™ 2 Transfer Stacks, nitrocellulose, regular size（# IB23001 ）； iBlot™ 2 Transfer Stacks, PVDF, regular size（# IB24001 ）

     膜： PVDF膜（0.2μm、0.45μm；8x8cm、8x13cm）；NC膜（ 0.2μm；8x8cm、8.3x13cm ）; 转印膜组（包含PVDF膜/NC膜、滤纸、缓冲液）； 滤纸（0.83mm、2.5mm）                 

 凝胶或印迹膜染料  

    通过电泳分离蛋白条带后，可以使用不同的凝胶内检测方法直接将其可视化。染料包括：考马斯染料、银染、荧光蛋白染色剂。                                                            

三、检测（Detect）

     根据抗原抗体的特异性结合，对目的蛋白质进行检测。涉及一抗孵育、二抗孵育、抗体检测和一系列漂洗过程。  

   漂洗缓冲液

     在抗体孵育操作中必须进行漂洗，以除去未结合的试剂并减少背景。

     漂洗不充分可能导致高背景，同时，过度清洗可能会从印迹上洗脱抗体或抗原而导致灵敏度下降。

     漂洗时可能会用到一系列缓冲液。通常在生理缓冲液中进行漂洗步骤，比如 Tris-缓冲生理盐水（TBS）或磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）。在缓冲液中加入去垢剂，比如 Tween-20，有助于去除非特异性结合的物质。Tween-20（0.05％-0.2％）的量可根据所用抗体的结合强度而变化。弱结合抗体可能会被过多的去垢剂洗掉。

     在使用碱性磷酸酶结合物的应用中，应选择 TBS，因为 PBS 会干扰碱性磷酸酶。进行荧光蛋白质印迹时，建议避免在封闭步骤中使用去垢剂。因为去垢剂会自发荧光，导致背景更高。

抗体剥离液

  蛋白质印迹的再次检测可节省时间和样品，并可根据实验需求优化检测结果。

  使用抗体剥离液原因和优点：

• 节省样品  

       当蛋白质混合物很少或很珍贵时，重新检测印迹可节省样品，实现在同一张膜上使用相同或不同的抗体进        行分析。

• 节约时间运行 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后将蛋白质转移到膜上是很费时的。通过在同一张印迹膜上进行多次检测，可以节省时间。
• 降低成本通过重复使用相同的印迹，可以节省膜、缓冲液和蛋白质样品的成本。
• 检测优化更容易高灵敏度化学发光底物的发光强度通常需要优化抗体浓度来调整，以获取高质量的印迹。通过剥离膜并用不同的抗体浓度进行检测，可以轻松实现优化。
• 快速纠正错误免疫印迹的孵育涉及许多操作步骤，很多环节容易出现错误，比如孵错抗体。通过剥离印迹膜，印迹可以重复使用，而无需重新凝胶电泳。

抗体剥离液产品：#21059，#46430，#62300

蛋白质免疫印迹流程中的关键步骤之一是将蛋白质从电泳后的聚丙烯酰胺凝胶上转印到硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，以便使用抗体检测特异靶蛋白。我们开发了适用于湿式、半干式和干式印迹法的电泳转印系统。

1.蛋白转印系统

2. 印迹膜

PVDF（聚偏二氟乙烯）膜和硝酸纤维素膜可提供不同的孔径和尺寸选择，满足不同的应用需求。蛋白质的性质（即电荷，疏水性等）会影响其与膜表面结合的能力，因此要找到最理想的印迹膜，可能需要在不同的膜上测试特定的蛋白质。我们的预剪裁，预组装的Western Blot印迹膜/滤纸三明治非常适合您的凝胶，使蛋白质转印更加轻松便捷。另外，也可以使用我们的硝酸纤维素膜， PVDF 膜以及滤纸自行组装转印三明治。

一. 蛋白凝胶电泳（SDS-PAGE）

所有 Invitrogen 预制胶都是高质量的聚丙烯酰胺凝胶，旨在提供卓越的性能、可靠性、可重复性和质量一致性。我们种类齐全的预制胶产品系列为您的研究提供了多种凝胶选择。无论您的目标蛋白是 2.5 kDa 还是高达 500 kDa，或者希望在非变性条件下或通过等电点分离蛋白质—我们都有适合您应用的凝胶。

对于变性凝胶电泳 SDS PAGE，根据应用和目标蛋白的大小，有许多选择。对于大多数蛋白质的电泳分离， Bis-Tris 和 Tris-甘氨酸是两种常用的凝胶体系，并不断经过优化，以提高性能和延长保质期。当蛋白质丰度较低或下游应用需要高蛋白质完整性（例如翻译后修饰分析，质谱或测序）时，建议选择 Bis-Tris 凝胶体系。Bis-Tris 体系在电泳过程中可提供中性pH（pH 7.0）环境，有助于提升样品完整性和凝胶稳定性。这有助于减少蛋白质修饰，并带来更清晰锐利的条带。我们的 Bolt Bis-Tris Plus 和 NuPAGE Bis-Tris 预制胶采用 Bis-Tris 凝胶体系。Bolt Bis-Tris Plus 小型预制胶基于广泛使用的 NuPAGE Bis-Tris 预制胶体系，并具有容量更大的上样孔—每孔最多可上样 60 µl。

如要分离高丰度蛋白质，也可选择高性能的 Novex Tris-甘氨酸预制胶，这种预制胶基于经典体系而优化，提升了蛋白质分离效果和保存稳定性。对于高分子量蛋白质的分离，建议使用 NuPAGE Tris-乙酸预制，适合分离40-500 kDa范围的蛋白样品。要分离低分子量蛋白质，建议使用 Novex Tricine 预制胶，该凝胶可优化分子量低至 2.5 kDa 的蛋白质的分离效果。

1.Invitrogen SureCast手灌胶产品

套餐优势：

•  不漏液设计 — 极大提高了制胶的成功率，节约时间和精力 

•  玻璃板耐用性极佳 — 耐用程度高达其他供应商的20倍 

•  独特的倾斜支脚设计 — 最大限度避免漏液，帮助您更放心地灌注凝胶 

•  简单的组装步骤 — 两步操作即可完成组装，开始灌胶 

•  兼容性好 — 与SureCast手灌胶试剂或其他品牌的聚丙烯酰胺灌胶试剂兼容

SureCast手灌胶试剂优势：

• 方便的袋装干粉 — 将袋中的粉末溶于水，即可制成可直接使用的缓冲液 

• 节省时间和空间 — 无需称重、计算、调节pH，也无需分别采购每种试剂组分 

• 保质期长 — 以干粉形式放置和储存，可避免长期保存储存液的稳定性问题

SureCast丙烯酰胺溶液 — 室温储存；保质期长；纯度高；液体形式比丙烯酰胺 粉剂更安全；浓缩(40%)配方，可制备的凝胶百分比浓度范围更广

1) 手灌胶套餐

2）手灌胶单品

2.  预制胶产品

3. 预染蛋白分子量标准

4. 蛋白染料

无论您是需要快速的目测判断，或是高灵敏度染料以对低丰度蛋白进行检测，我们都能为您的凝胶内和印迹膜上的检测提供多种易于使用且高效的蛋白染料。查看我们全面的染料目录，其中包括考马斯染料、银染、荧光染色剂、标签融合蛋白染色剂以及翻译后修饰蛋白凝胶染料。

蛋白制备的目的是获取高品质蛋白样品，以尽可能提高下游分析的成功率（例如蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀和质谱分析）。由于蛋白质的结构和功能各不相同，如何平衡提取效率和下游分析中所需蛋白功能的维持是经常面临的挑战。这种权衡对于生物学现象的研究来说至关重要，而实验的成功取决于蛋白样品制备的所选方法和试剂。遵循以下5个步骤，实现高质量的蛋白样品制备。

一.  蛋白提取

1.从样品中提取你的靶蛋白

蛋白分析的第一步是蛋白提取，这就需要释放不同来源样品中的蛋白质。无论通过机械处理还是基于去垢剂的提取方法，都会不可避免地破坏细胞稳态，导致蛋白降解或不稳定。因此，提取过程中蛋白的完整性直接决定了下游蛋白样品分析所得数据的质量。例如，某些提取方法可能在细胞裂解和细胞内含物的溶解方面有效，但可能会导致蛋白变性，影响天然蛋白相互作用的检测和分析。

2. 样品类型

培养的哺乳动物细胞，哺乳动物组织和原代细胞是生理相关的内源性蛋白（包括翻译后修饰）研究，以及过表达系统（瞬时或稳态）的常见样品来源。当提取哺乳动物组织中的蛋白质时，需要一些温和的酶或机械破碎手段来帮助从较复杂组织基质中分离细胞。对于仅通过质膜将细胞内容物与环境隔离开的培养哺乳动物细胞和原代细胞来说，试剂中的去垢剂可打破蛋白-脂质膜双层结构，使总蛋白提取更为容易。通常所研究的或用于重组蛋白表达系统的其他生物体包括细菌、酵母和植物。这些细胞类型含有细胞壁，需要额外使用酶解或机械破碎的方法才能有效释放蛋白。然而，目前已开发出基于去垢剂的解决方案，可有效提取和溶解这些细胞中的蛋白，而无需机械外力破坏。该方法对于处理更多样品数量或使用自动提取和纯化方案来说尤其重要。

3. 亚细胞分级分离

对于大多数研究来说，只需直接制备全细胞裂解物以获取可溶蛋白样品，用于下游直接检测或进一步纯化与分离。但是，如果在蛋白提取之前将细胞分为不同的区室或细胞器，可以显著提高特定蛋白的产量或富集率。机械裂解通常会破坏所有细胞区室，使分离特定细胞组分变得更加困难。但是，通过谨慎优化试剂，已开发出基于逐级差异去垢剂的方法来分离核蛋白、胞质蛋白和膜蛋白组分。该方法可以将疏水性膜蛋白溶解，使其与亲水蛋白分离，并且可以分离完整细胞核、线粒体和其他细胞器，用于直接研究或分步提取蛋白。

样品来源或样品类型。收集样品时的常用蛋白来源可能包括哺乳动物细胞培养物、组织或体液等天然来源。此外，蛋白也可能在表达系统（例如酵母、细菌、昆虫或哺乳动物细胞）中过表达。

蛋白制备决策树。该图描述了选择特定蛋白分离方法时涉及的考虑因素。

蛋白样品制备流程。该工作流程首先是进行细胞裂解，样品制备涉及的步骤实现了将含有组分的蛋白从起始生物来源转变为均质溶液，同时保留蛋白的体内状态。获得高品质裂解物对于成功进行下游应用来说至关重要。

小贴士：

· 细胞裂解时会破坏细胞膜和细胞器，导致蛋白水解活性不受调控，从而降低蛋白产量并影响蛋白功能。为了防止提取的蛋白降解，通常需要在细胞裂解试剂中添加蛋白酶和磷酸酶抑制剂。

· 通过 SDS-PAGE 分析溶解蛋白和不溶性组分样品，可测定所用蛋白提取方法的效率。

二.  蛋白防降解

1.防止你的靶蛋白降解

细胞裂解时会破坏细胞膜和细胞器，导致蛋白水解活性不受调控，从而降低蛋白产量并影响蛋白功能。为了防止提取的蛋白降解并保持其活性，通常需要在细胞裂解试剂中添加蛋白酶和磷酸酶抑制剂。

蛋白酶抑制剂通过与蛋白酶活性位点结合而起作用。由于蛋白水解机制的差异，单一化合物无法有效抑制所有蛋白酶，因此，需要使用几种不同抑制剂的混合物来确保蛋白提取物在下游分析之前不被降解。典型的抑制剂混合物包括丝氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸蛋白酶等小分子抑制剂，以及氨基肽酶和金属蛋白酶。尽管有些抑制剂是不可逆的，但很多抑制剂是可逆的，它们需要长时间存在于粗制样品中，直到后续进行了纯化，免除了蛋白水解活性的风险为止。

同样，磷酸酶也各有不同，因此建议使用有效的磷酸酶混合物（含丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、酸性和碱性磷酸酶的抑制剂）来保持脆弱的磷酸化翻译后修饰。

2. 通过使用正确的保存方法来防止靶蛋白降解：

· 快速操作并保持样品低温（可使用液氮冷冻样品）

· 抑制或灭活内源性蛋白酶和磷酸酶

· 添加保护或稳定化合物，例如还原剂和酶抑制剂

· 通过沉淀稳定或灭活蛋白

小贴士：

大多数研究人员会使用几种不同抑制剂的混合物，以确保蛋白提取物在靶标分析之前不被降解。蛋白酶抑制剂基本在所有蛋白提取中都需要使用，而磷酸酶抑制剂仅在研究磷酸化状态时才需要使用。

三. 蛋白除杂

1.蛋白样品除杂

蛋白提取后，蛋白样品通常含有影响蛋白稳定性或与下游应用不兼容的杂质。透析、脱盐和浓缩是去除蛋白样品中常见小分子污染物（例如盐和去垢剂）的三种常用方法。根据下游应用要求，选择方法时的考虑因素可能包括样品起始量、蛋白功能和处理时间。透析、脱盐和浓缩的有多种规格和包装形式。

2. 透析

透析是一种经典分离技术，它通过半透膜选择性扩散，去除蛋白溶液中的小分子和不需要的化合物。将样品和缓冲液置于膜的相对侧。大于膜孔的蛋白保留在膜的样品侧，较小的分子（污染物）通过膜自由扩散，直至达到平衡浓度。这种技术可以使样品中小分子污染物的浓度降低至可接受水平。

3. 脱盐

体积排阻色谱法也称凝胶过滤法，可用于去除样品中的盐分。使用这种技术时，需要选择一种孔足够大的树脂使小分子盐进入，但也要足够小，使靶蛋白不能进入。通过这种方法来减缓杂质的迁移速度，使较大且较快的蛋白在重力流或离心过程中与较慢且较小的分子分离开。

4. 浓缩

蛋白浓缩与透析法类似，其使用半透膜将蛋白与小分子量化合物分离。与透析法的被动扩散原理不同，浓缩是通过离心使溶液穿过膜而实现的。在离心过程中，缓冲液和小分子量溶质均被动穿过膜，并在另一侧收集（滤液）。大分子（蛋白）保留在膜的样品侧，其随着试剂被动穿过膜到达另一侧而浓缩为小体积液体（截留液）。

小贴士:

· 如果蛋白浓度太低而无法进一步处理或分析，可以使用离心浓缩管快速浓缩样品。

· 若要在浓缩技术中进行缓冲液置换，可以使用置换缓冲液稀释截留液并离心。此过程可以重复进行，直至达到所需置换或脱盐水平。

四. 蛋白定量

1. 靶蛋白定量

总蛋白浓度测定是通过生化方法分离和分析蛋白的工作流程中的重要步骤。定量方法可以选择使用荧光计、分光光度计或酶标仪进行荧光法或比色法检测。根据分析类型和所分析特定蛋白样品的不同，每种蛋白检测方法都存在其局限性。选择蛋白检测方法时需要考虑的重要特性包括灵敏度（检测下限）、与样品中常见物质（例如去垢剂、还原剂、离散剂、抑制剂、盐和缓冲液）的兼容性、标准曲线线性度以及蛋白间差异。

2. 比色法蛋白定量

可使用酶标仪或分光光度计检测比色信号。我们最受欢迎的比色法蛋白定量试剂有：

      · BCA 定量：蛋白-铜螯合及还原铜的二次检测

      · Bradford 定量：蛋白-染料结合，可直接检测与结合染料相关的颜色变化

3. 荧光法蛋白定量

基于荧光进行蛋白定量是除比色法以外的另一选择。荧光检测法具有出色的灵敏度，所需蛋白样品量少，可节省更多样品用于其他实验。此外，读取时间并非关键因素，因此这种检测方法可轻松应用于自动化高通量分析。可使用荧光计或酶标仪检测荧光信号。

小贴士：

· 没有一种试剂是所有应用的完美或最佳方法。每种方法都有其优势和劣势。

· 可根据样品类型、检测时间、读数（比色法或荧光法）以及与去垢剂或还原剂的兼容性，通过交互式蛋白定量方法选择指南来选择产品。

五.  蛋白检测

根据实验需要，可以使用多种方法来检测和分析靶蛋白。以下是用于检测和分析复杂混合物（例如裂解物和血清）中蛋白质的常见技术，以及各种技术的特点和常见要求。

一.    蛋白抽提试剂

我们提供多种细胞及组织类型的蛋白抽提试剂，包括总蛋白抽提试剂、细胞器蛋白组分抽提试剂、亚细胞蛋白组分抽提试剂，并提供蛋白抽提所必须的蛋白酶、磷酸酶抑制剂。专门针对各类样品进行了优化，收集得到的蛋白组分可广泛用于下游应用。产品特点包括：

· 提高细胞或组织的蛋白质提取产量

· 配方温和，有利于保留蛋白活性，使之适用于各种下游实验

· 兼容蛋白定量、免疫沉淀、免疫分析、免疫印迹、EMSA和酶活性测定

· 经过多种组织类型与细胞系验证

· 避免机械力破坏细胞

1.总蛋白提取：

利用温和有效的细胞裂解液，从哺乳动物组织或细胞中进行总蛋白质提取。此类细胞裂解液已经过优化，并采用某些类型的组织、原代及培养的哺乳动物细胞进行过验证。提取的蛋白质可兼容大多数蛋白质分析实验及常规的下游应用。相较于市面上其他同类或自制配方细胞裂解液，此类细胞裂解液可提供更高的蛋白得率。这种方便的单瓶细胞裂解液通常可在5-10 min内完成样品处理。在裂解原代和培养细胞时，不需要采取机械破碎方法。

2. 细胞器蛋白组分分离：

提供各类优化试剂盒，适用于Dounce匀浆法和密度梯度进行蛋白的亚细胞分离以及各类细胞器（如细胞核，线粒体，过氧化物酶体和溶酶体）的分离。

3. 亚细胞蛋白组分分离：

此类试剂盒经过特别优化，可用于在1-3小时内从不同的细胞组分之中逐步分离、富集和提取蛋白质，适用于细胞质、细胞膜、细胞核、染色质结合蛋白以及细胞支架蛋白等。分离所得大多数组分与蛋白质检测和常规的下游应用兼容。

一. 蛋白纯化

我们提供多种形式的蛋白质纯化和抗体纯化树脂，您可从中选出适合蛋白纯化实验流程的最佳方案。或者通过将特定配体共价交联到我们提供的活性介质上，获得您的定制化纯化树脂。

我们提供预先活化的磁珠、磁性琼脂糖微珠、标准品及Superflow琼脂糖树脂、POROS™树脂，以及其它色谱填料，可以进行几乎任何规模的蛋白质纯化：检测、筛选、小试、中试，以及工艺建立。此外，我们还研发了一系列针对蛋白纯化的辅助产品，包括一次性离心柱，结合及洗脱缓冲液，帮助您顺利完成纯化蛋白实验。

纯化树脂的特点：

· 产品多样性 —— 用于蛋白质和抗体纯化和富集的亲和纯化填料和离子交换树脂，以及可共价固定不同配体的活化介质填料。

· 包装规格多样性 —— 磁珠、96孔滤板、散装树脂、离心柱、试剂盒和色谱预装柱便于进行筛选和其它小规模实验以及工艺规模的蛋白质纯化

· 高性能 —— 树脂设计力争达到最大蛋白质纯化产量和最低背景

· 经济 —— 价格和我们的主要竞争对手相近或更低

选择合适的蛋白纯化策略：

1.离子交换纯化

2. 抗体纯化

抗体纯化方法包括从血清（多克隆抗体）、腹水液或者杂交瘤细胞系（单克隆抗体）的培养物上清液中分离出抗体。

抗体纯化方法从非常粗制到高度特异性不等：

· 粗制型抗体纯化方法 - 血清总蛋白（包括免疫球蛋白）的一个子集形成沉淀

· 一般型抗体纯化方法 - 对特定抗体类别（如 IgG）进行亲和纯化，但不考虑抗原特异性

· 特异性抗体纯化方法 - 仅对在样品中与特定抗原分子结合的那些抗体进行亲和纯化

获得可用抗体所需的抗体纯化水平取决于该抗体的预期用途。我们提供种类繁多的琼脂糖珠、亲和柱和纯化试剂盒，以从血清、腹水液或组织培养上清液中进行全部或特异性抗体纯化。 我们提供的抗体纯化产品包括多种蛋白A、蛋白G、蛋白A/G和蛋白 L。

3. 融合蛋白质纯化

我们提供了一系列用于重组蛋白质纯化的Thermo Scientific™纯化树脂，可用于从大肠杆菌或毕赤酵母等培养物中纯化重组蛋白质。此类树脂现可提供多种规格可满足多种需求，可用于筛选、分批纯化、中试及工艺纯化。Superflow树脂已经过充分的化学鉴定。

· 产品选择范围广– 提供有一系列有助于达成您纯化目标的配体和支持物

· 高性能 – 树脂可以最大限度提高结合能力、纯度、批次规格和/或处理时间

· 灵活 – 现可提供多种规格，包括大包装树脂、离心柱和试剂盒、FPLC柱试剂条以及96孔离心反应板

†详见产品页面。
*不确定。

4. 生物素亲和纯化

我们提供多种用于纯化生物素化或去硫代生物素化的蛋白质，肽和其他分子的树脂。这些树脂有多种包装规格，以及用于某些配体的旋转柱，试剂盒和包被板。根据亲和素，链霉亲和素，NeutrAvidin或CaptAvidin蛋白选择产品。

·  产品选择 - 多种生物素结合选择可满足您的纯化需求

· 高性能 - 最大限度地提高结合能力和洗脱条件的树脂

· 灵活 - 提供多种包装尺寸

5. 生物素亲和纯化

我们提供各种活化的支持物和配件，用于固定蛋白质，抗体和其他分子。 这些树脂可以单独购买，也可以通过方便的套件购买。 选择基于NHS-酯，AminoLink™，SulfoLink™，GlycoLink™，CarboxyLink™和其他活化技术的树脂。

· 产品选择 — 多种偶联化学方法可满足不同的固定化策略

· 高性能 — 最大限度地提高耦合效率和结合能力的树脂

· 灵活 — 提供多种包装尺寸和格式

在细胞裂解或分离之后，裂解物经常包含与下游步骤不兼容的污染物。我们提供多种装置和树脂，以便简单高效的脱盐、缓冲液置换以及从样本中去除去垢剂。此外，如果蛋白质浓度过低而不适于后续实验和分析，您可以使用离心浓缩管快速浓缩样本。

* 针对于10K MWCO（取决于不同的装置——其它截留分子量的处理时间可能不同）

一.  透析装置、透析卡、96孔微量透析板及透析袋

Thermo Scientific透析装置可对10 μL ~ 250 mL样本实现快速、无损透析。与标准的扁平透析袋不同，上述新型装置无需使用可能导致渗漏和样品损失的结扣或夹子。

Pierce 96孔微量透析板和Slide-A-Lyzer微量透析装置非常适合处理小体积样品，Slide-A-Lyzer透析卡（原版和G2）适合处理中小体积样品，而Slide-A-Lyzer透析瓶则适合处理较大体积样品。特点：

· 卓越的样品回收率 — 相较于过滤和树脂体系，低结合性的塑料和膜可以最大程度的减少样品损失

· 方便 — 易于握持，方便使用注射器和/或移液器进行加样和取样。

· 安全 — 密封膜有助于防止渗漏，而透析袋和自制装置可能产生渗漏

· 经过验证 — 每个产品装置在生产过程中都通过了漏液试验。

1.选择适合您实验的透析装置