Rainbow校准颗粒	AlignFlow 流式细胞比对微球
用途	流式细胞仪日常校准
内容	Single mixture of particles featuring 8 different fluorescent intensities.	Single fluorescence, laser-specific particles available in three versions (per laser excitation).
激光类型	UV至红色激光	UV 激光		蓝色激光		红色激光
激发	365–650 nm	350–370 nm		488 nm		633 nm
发射	400–680 nm	400–470 nm		515–660 nm		645–680 nm
微球直径	3.0–3.4μm	2.5μm	6.0μm	2.5μm	6.0μm	2.μm	6.0.μm
货号	A34305	A16502	A16505	A16500	A16503	A16501	A16504

Rainbow 校准粒子

Rainbow校准粒子包含3.0微米粒子的混合物，这些粒子具有不同的荧光强度。 校准颗粒可用于波长范围从365 nm到650 nm的流式细胞仪的常规校准。

图1. 488 nm激发和530/30 nm发射的粒子荧光的直方图分析。

图2.在488 nm激发和530/30 nm发射下相对于633 nm激发和670/14 nm发射下绘制的粒子荧光。

 

比对

 

Invitrogen AlignFlow 流式细胞比对微球是一种用于流式细胞仪比对、聚焦并校准的可靠对照。 这些荧光染色的聚苯乙烯微球颗粒在大小和荧光强度上具有高度的一致性（图 3），并可模拟与生物学样品具有相似的大小、发散波长和强度。 由于染料包含在微球的基质内部而非表面，AlighFlow 微球具有极佳的光化学性和物理稳定性，为仪器的设置提供了可靠的对照信号。 相应荧光染料也是基于流式细胞分析常用激光光源而选择的，可实现最佳激发效果。

AlighFlow 微球具有三种不同的版本，分别适用于： 350-370 nm 激发波长的紫外激光，488 nm激发波长的蓝色激光以及 633 nm 激发波长的红色激光。 每种版本具有两种微球大小： 2.5 μm 和 6 μm 直径。 可参阅下面的表格进行产品的选择。

 

图3： Invitrogen AlignFlow 流式细胞比对微球在 488 nm 处被氩离子激光激发并在三种散射频段里被监测。 宽泛的荧光散射在全部三种频段内均被监测到。 请注意微球荧光强度上极低的变异。 Roswell Park 癌症研究所的 Carleton Stewart 供图。

 

	流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒
用途	该试剂盒可用于检查：
	颗粒大小测量的分辨率极限和动态范围
	前向和侧向散射光电倍增管的灵敏性
	仪器基线噪音水平
	激光和光学设备的比对和稳定性
	流体系统的稳定性
内容	6种个绿色荧光微球悬浮液（直径为0.02微米至2.0微米）。
激光类型	蓝色激光
激光	488 nm
发射	515 nm
货号	F13839

亚微米颗粒大小对照

Invitrogen 流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒可提供一组发绿色荧光的微球悬浮液来为流式细胞分析用户提供可靠的大小对照。 该试剂盒含有六种聚苯乙烯微球悬浮液，每种均具有由透射电子显微镜所确定的已知直径。 所有微球的激发和散射图谱都与 Invitrogen Alexa Fluor 488 染料或 FITC 染色细胞（最大激发和散射波长分别为 505 nm 和 515 nm）。

实验样品中生物颗粒的大小（或大小范围）可通过比较它们与对照微球的 FSC 预估（图 4）。 每种成分中的微球都可作为可重复的大小标尺并用于单独（单一大小）、预混（两至六种）、与实验样品交叉混合或平行实验使用。 该试剂盒可用于验证仪器的性能并创建适用于亚微米颗粒分析的参数。 例如，该试剂盒可用于检查：

• 颗粒大小测量的分辨率极限和动态范围

• 前向和侧向散射光电倍增管的灵敏性

• 仪器基线噪音水平

• 激光和光学设备的比对和稳定性

• 流体系统的稳定性

图4：  Invitrogen 流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒。 在 Attune 声波聚焦流式细胞仪上利用 488 nm 激发光和 530/30 nm 带通（BP）发射滤波器进行流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒五种不同大小颗粒（该试剂盒含有六种颗粒大小；这里仅使用了五种）的信号收集。 在颗粒荧光与侧向散射相关的散点图上鉴定五种不同绿色荧光微球的大小。

	流式细胞大小校准试剂盒
用途	通过将FSC信号与参考微球的信号进行比较，估计实验样品中的细胞​大小。
内容	包含六个未染色的聚苯乙烯微球（直径为1.0微米至15微米）的悬浮液。
激光类型	全部
货号	F13838

Invitrogen 流式细胞大小校准试剂盒可提供一组不发荧光的微球悬浮液来为流式细胞仪用户提供可靠的大小对照。 该试剂盒含有六种未染色的聚苯乙烯微球悬浮液，每种均具有由透射电子显微镜所确定的已知直径。 实验样品中的细胞大小可通过对前向散射 (FSC) 信号和对照微染料进行比较而得以预估。 微珠可作为具有可重复性的大小标尺（图3）并可与实验样品进行交叉混合或用于平行实验。

图 5. Invitrogen 流式细胞大小校准试剂盒。 前向散射强度 (FSC) 与流式细胞大小校准试剂盒中提供的六种聚苯乙烯微珠样品的频段值之间的对数关系分析结果直方图。 FSC测量在 Becton Dickinson FACScan™ 式细胞仪上采用 488 nm 激发光进行。

该微球具有6 μm（±10％）的直径，与许多生物学样品具有近似的大小，散射波长 和强度。因此，该微球还可以用于检测细胞分选仪的设置，如滴液延迟和效率（分选过程中的细胞损失）。该微球还是用于在不浪费宝贵而灵敏的实验中 材料的情况下进行流式细胞仪的激光源，光学设备和射流的校准。

图 6. Invitrogen 蓝色激光细胞分选设置微球（实线）和荧光素标记细胞（虚线）的均一化散射光谱。 细胞分选设置微球的较窄散射光谱几乎处在荧光素较宽散射光谱的中央。

 

 

	细胞分选微球
用途	流式细胞仪分选仪的常规校准。 珠子可用于检查细胞分选仪设置，例如掉落延迟和效率（分选过程中细胞损失）。
内容	荧光染料注入的6微米（+/- 10％）微球已经过优化，可与紫外线，蓝色，绿色/黄色和红色激光一起使用。
激光类型	UV	蓝色激光	绿色/黄色激光	红色激光
激光	UV 405 nm	488 nm	532/561 nm	633 nm
发射	460 nm	515 nm	575 nm	680 nm
配对荧光染料	DAPI，Hoechst 染料	FITC, Alexa Fluor 488	R-PE，四甲基若丹明	Cy 5
货号	C16506	C16508	C16509	C16507