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文章目录

1. 犬类白细胞免疫表型标志物
2. 犬类免疫细胞表型分析的不同检测方案
2.1. 犬类T细胞三色表型分析
2.2 犬类免疫细胞五色表型分析
2.3 犬类免疫细胞九色表型分析
3. 犬类免疫细胞分布情况

犬类(狗)免疫细胞分型分析研究

流式细胞术是根据细胞表达的蛋白对细胞进行识别和表征。通过流式细胞术进行免疫表型分析是免疫学和临床诊断中的关键技术 。流式细胞术可同时分析多种标志物,其能力受限于抗体、结合物以及流式细胞仪性能的范围。在某些情况下,对犬样本进行免疫表型分析有助于准确了解动物的免疫功能状况

1. 犬类白细胞免疫表型标志物

    犬类白细胞免疫表型标志物是规划表型分析检测指标的良好起点:

标志物 细胞类型 克隆号 货号
CD3 T细胞 CA17.2A12 AD0103110
CD4 辅助性T细胞 YKIX302.9 AD2904110
CD5 T细胞和一小部分B细胞 YKIX322.3 AD0605110
CD8α 细胞毒性T细胞 YCATE55.9 AD0708110
CD18 白细胞 YFC118.3 AK0118110
CD19 B细胞    
CD20 成熟B细胞    
CD21 成熟B细胞 LT21 AK1921110
CD25 活化淋巴细胞 P4A10 AD3025110
CD34 祖细胞/前体细胞 1H6 AD0234110
CD44 造血细胞 MEM-263 AK0144110
CD45 白细胞 YKIX716.13 AD0145110
CD94 NK细胞 HP-3D9 AK0394110
IgM 未成熟/成熟B细胞    
MHC II 单核细胞、组织细胞、淋巴细胞 YKIX334.2 AD0111110
TCRαβ αβ T细胞    
TCRγδ γδ T细胞    

 

2. 犬类免疫细胞表型分析的不同检测方案

    根据犬类免疫细胞表型的不同,可以设计不同的检测方案组合检测不同的细胞亚群:T细胞、辅助性T细胞、细胞毒性T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞和粒细胞等

2.1. 犬类T细胞三色表型分析

    犬类T细胞基本分为:总T细胞、辅助T细胞和细胞毒性T细胞,可通过检测细胞表面抗原 CD3、CD4 和 CD8 来实现表型分析检测。使用了简单的三色荧光试剂盒,用于检测 T 细胞(CD3)、辅助 T 细胞(CD4)和细胞毒性 T 细胞(CD8)。犬嗜中性粒细胞也表达 CD4,并且与其它物种不同,犬在外周血中可出现 CD4+CD8+细胞(双阳性细胞)。

CD3-FITC

CD4-PE

CD8-APC

 

 CD3+CD4+ 辅助T细胞、CD3+CD8+ 细胞毒性T细胞,或单独的 CD4+ 和 CD8+ T 细胞亚群

2.2 犬类免疫细胞五色表型分析

犬类T细胞、B细胞和单核细胞的五色表型分析:

T细胞 CD3/CD4/CD8
B细胞 CD21
单核细胞 CD14

 

2.3 犬类免疫细胞九色表型分析

犬类免疫细胞:T细胞、B 细胞、 NK 细胞、单核细胞和粒细胞表型分析。

根据FSC和SSC区分淋巴细胞、单核细胞和粒细胞群,淋巴细胞亚群中MHC II +CD5+双阳性淋巴细胞,进一步表征MHC II +CD5+CD3+ T细胞,继而分析MHC II +CD5+CD3+ CD4+辅助和 MHC II +CD5+CD3+ CD8+细胞毒性 T 细胞,同时用CD5和CD21表征CD5 -CD21+ B细胞。CD4- CD94 +表征NK/NKT细胞群。粒细胞中的中性粒细胞亚群CD4+ CD18+ 双阳性细胞。单核细胞:MHC II+CD14+CD18+

 

3. 犬类免疫细胞分布情况

细胞名称 标志物 比例分布(单个核细胞中的比例)
T淋巴细胞 CD3+ 55±14.1%
CD4辅助T细胞 CD3+CD4+ 32.1±9%
CD8细胞毒性T淋巴细胞 CD3+CD8+ 13.5±6.6%
TCRγδ淋巴细胞 CD3+TCRγδ+ 1.6±1.3%
CD4+CD8+双阳性淋巴细胞   1.4±4.2%