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为最大限度降低交叉反应性，这些偶联前的山羊抗小鼠IgG (H+L) 二抗全抗体已通过亲和纯化，并针对人IgG和人血清进行交叉吸附处理。交叉吸附（或称预吸附）是通过纯化步骤提高抗体特异性，从而增强检测灵敏度并减少背景染色。该技术是将二抗溶液流经含潜在交叉反应物种血清蛋白的固定化层析柱，仅非特异性结合的二抗会被柱体捕获，而高特异性二抗则顺利流过。这一额外纯化步骤的优势在多色标记实验（如流式细胞术）中尤为显著——此类实验可能存在与其他一抗的交叉反应；或在组织/细胞荧光染色实验中——当样本存在内源性免疫球蛋白时。

Alexa Fluor染料是当今最值得信赖的荧光染料之一。Alexa Fluor 647染料是一种近红外荧光染料，其激发特性完美匹配647 nm激光线。该染料在成像和流式检测中能产生稳定信号，且在宽摩尔浓度范围内不受pH值影响。具有高荧光量子产率和高光稳定性的特性，使其能以极高灵敏度检测低丰度生物结构。Alexa Fluor 647染料分子可与蛋白质以高摩尔比结合而不产生显著自淬灭，因此能制备更高亮度的偶联物，实现更灵敏的检测。每个偶联物的标记度通常为每个IgG分子结合2-8个荧光基团。

使用前，请先用微量离心机短暂离心蛋白偶联物溶液，仅取上清液加入实验。此步骤可消除储存过程中可能形成的蛋白聚集体，从而降低非特异性背景染色。由于染色方案因应用而异，抗体最佳稀释度需通过实验确定。对于荧光标记抗体，大多数免疫组化和流式细胞术应用推荐1-10 µg/mL的终浓度。

靶标信息

抗小鼠二抗是经过亲和纯化的抗体，对小鼠免疫球蛋白具有明确特异性，适用于其靶标的检测、分选或纯化。二抗可显著提升实验灵活性，允许研究人员采用多种检测系统（如HRP、AP、荧光标记等）。通过信号放大作用（单个一抗可结合多个二抗），它们还能提供更高的检测灵敏度。常规制备方法是通过用目标物种混合免疫球蛋白免疫宿主动物获得二抗，随后可进一步纯化和修饰（如免疫亲和层析、抗体片段化、标记偶联等），从而获得高特异性试剂。