成分与原理

• ​主要成分：主要含有葡聚糖、泛影酸钠等。葡聚糖是一种高分子量的多糖，它可以增加溶液的黏度和密度；泛影酸钠则有助于提高分离液的稳定性和分离效果。
• ​分离原理：基于不同细胞类型密度的差异来实现分离。粒细胞和红细胞由于密度较大（大约1.090 g/mL），会在分离液的下层聚集；血小板密度较小（1.030 - 1.035 g/mL），可能会分布在分离液的上层；而淋巴细胞和单核细胞的密度处于1.075 - 1.090 g/mL之间，正好位于分离液与血浆形成的界面处，从而可以通过离心操作将它们有效分离出来。

分离流程

1. ​样本准备：采集人外周血、脐带血或骨髓等样本，并进行适当的抗凝处理，以防止血液凝固。
2. ​分层：将适量的ImunoSep™密度梯度细胞分离液小心地加入到离心管底部，然后将抗凝后的血液样本缓慢加在分离液之上，注意保持界面清晰，避免混合。
3. ​离心：将离心管放入离心机中，按照特定的转速和时间进行离心（常见的条件如1500 - 2000 rpm，离心20 - 30分钟）。在离心力的作用下，不同密度的细胞会依据密度梯度发生沉降和分层。
4. ​收集：离心结束后，小心吸取位于分离液与血浆界面处的单个核细胞层，转移到新的离心管中。
5. ​洗涤：加入适量的缓冲液（如磷酸盐缓冲液PBS），对收集到的单个核细胞进行洗涤，以去除残留的分离液和其他杂质。一般通过低速离心（如500 - 1000 rpm，离心5 - 10分钟），弃去上清液，重复洗涤2 - 3次 。
6. ​重悬：最后用合适的细胞培养液或其他实验所需溶液重悬细胞，即可得到用于后续实验或研究的单个核细胞悬液 。

应用领域

• ​基础研究：在免疫学、血液学等领域的基础研究中，用于获取纯净的单个核细胞进行细胞功能、信号传导、基因表达等方面的研究。
• ​临床诊断：辅助诊断某些血液系统疾病、免疫相关疾病等，通过对分离得到的单个核细胞进行检测和分析，了解机体的免疫状态和病理变化。
• ​细胞治疗：为细胞治疗提供高质量的单个核细胞来源，在CAR - T细胞疗法、干细胞治疗等方面发挥重要作用 。