诺为生物

人肠类器官培养操作流程(原代)

人多能干细胞研究  目录

类器官相关研究 目录

IntestiCult™肠类器官生长培养基是一种完全的细胞培养基,可有效地建立和长期维持人肠隐窝产生的肠道细胞类器官。肠类器官为研究肠上皮提供了一种方便的体外器官培养系统成熟的肠道器官建立了突出的“芽”,类似于体内肠道隐窝。肠器官培养可应用于研究肠上皮的发育和功能,模拟肠道疾病,并进行靶向小分子筛选。肠类器官培养还可用于研究成体干细胞特性和再生治疗。

主要试剂和耗材


货号名称
IntestiCult类器官培养基(#06010IntestiCult类器官培养基组分A(#06011)
IntestiCult类器官培养基组分B(#06012)
36254含15mM HEPES DMEM/F12 培养基
37350不含钙和镁的D-PBS
07174GCDR细胞解离试剂
Corning,#3526TC-treated 24孔细胞培养板
72302Y-27632 (2HCl), 1 mg
Corning,#356231Corning Matrigel
35235070 µm细胞筛
07930CryoStor CS10冻存液
07910Trypsin-EDTA(0.05%)

试剂准备


A. 制备完全的IntestiCult™肠类器官培养基

采用无菌技术准备完全的IntestiCult™肠类器官生长培养基(组分A+组分B)。下面的示例用于制备100 mL完整培养基。如果准备其它体积,可做相应调整。

1. 室温(15 - 25℃)或2 - 8℃过夜解冻IntestiCult™肠类器官生培养基组分A和B,混合均匀。

注:一旦解冻,须立即使用,或分装储存于-20℃(最长储存3个月)。分装后的培养基在解冻后须立即使用,不可反复冻融。

2. 向50 mL IntestiCult™ 类器官生长培养基组分B中加入50 mLIntestiCult™ 类器官生长培养基组分A,混合均匀。

注:如不立即使用,可在2 - 8℃储存最多1周。

3. 使用前加入抗生素(例如:50μg/mL庆大霉素或者100 µg/mL青霉素/链霉素)。

B. DMEM + 1% BSA

用无菌技术制备DMEM+ 1%BSA。下面的例子是制备50 mL的DMEM+ 1%BSA。如果制备其它体积,可做相应调整。

1. 在50 mL离心管中,将 2 mL 25% BSA的加入到含有15 mM HEPES的48 mL DMEM/F12(货号#36254)中。

2. 涡旋混匀,置于冰上。

注:如不立即使用,可在2 - 8℃储存最多6个月。



人多能干细胞研究  目录

类器官相关研究 目录

0
在线客服
热线电话
010-57438396
010-56230491

微信公众账号